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技術(shù)文章

Technical articles

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  • 201710-20
    高血壓疾病動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究

    高血壓(hypertension)是指以體循環(huán)動(dòng)脈血壓(收縮壓和/或舒張壓)增高為主要特征(收縮壓≥140毫米汞柱,舒張壓≥90毫米汞柱),可伴有心、腦、腎等器官的功能或器質(zhì)性損害的臨床綜合征。高血壓是常見(jiàn)的慢性病,也是心腦血管病主要的危險(xiǎn)因素。正常人的血壓隨內(nèi)外環(huán)境變化在范圍內(nèi)波動(dòng)。在整體人群,血壓水平隨年齡逐漸升高,以收縮壓更為明顯,但50歲后舒張壓呈現(xiàn)下降趨勢(shì),脈壓也隨之加大。近年來(lái),人們對(duì)心血管病多重危險(xiǎn)因素的作用以及心、腦、腎靶器官保護(hù)的認(rèn)識(shí)不斷深入,高血壓的診斷標(biāo)...

  • 201710-20
    動(dòng)脈粥樣硬化研究動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

    動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)是冠心病、腦梗死、外周血管病的主要原因。脂質(zhì)代謝障礙為動(dòng)脈粥樣硬化的病變基礎(chǔ),其特點(diǎn)是受累動(dòng)脈病變從內(nèi)膜開(kāi)始,一般先有脂質(zhì)和復(fù)合糖類(lèi)積聚、出血及血栓形成,進(jìn)而纖維組織增生及鈣質(zhì)沉著,并有動(dòng)脈中層的逐漸蛻變和鈣化,導(dǎo)致動(dòng)脈壁增厚變硬、血管腔狹窄。病變常累及大中肌性動(dòng)脈,一旦發(fā)展到足以阻塞動(dòng)脈腔,則該動(dòng)脈所供應(yīng)的組織或器官將缺血或壞死。由于在動(dòng)脈內(nèi)膜積聚的脂質(zhì)外觀呈黃色粥樣,因此稱(chēng)為動(dòng)脈粥樣硬化。動(dòng)脈粥樣硬化模型,模型構(gòu)建方式常...

  • 201710-13
    科研中的miRNA研究方法總結(jié)

    科研中的miRNA研究方法總結(jié)microRNA(miRNA)是一類(lèi)長(zhǎng)度在22nt左右的內(nèi)源非編碼小RNA,廣泛存在于動(dòng)物、植物、病毒等多種有機(jī)體中。1993年,Lee等人在秀麗新小桿線蟲(chóng)(C.elegans)中發(fā)現(xiàn)了控制著線蟲(chóng)時(shí)序性發(fā)育的lin-4。2000年,Reinhart等發(fā)現(xiàn)了另一個(gè)具有轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)功能的小分子RNA:let-7。隨后的幾年時(shí)間里,許多研究人員相繼發(fā)現(xiàn)了這類(lèi)RNA,并將這些具有時(shí)空表達(dá)特異性的非編碼小分子RNA命名為microRNA(miRNA)。從長(zhǎng)的...

  • 201710-13
    RACE技術(shù)的原理和操作

    近年來(lái)隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展,出現(xiàn)了許多克隆新基因的方法和手段,如圖譜克隆技術(shù)、轉(zhuǎn)座子標(biāo)簽技術(shù)、mRNA差異顯示技術(shù)二基因組減法技術(shù)以及cDNA文庫(kù)篩選技術(shù)等。但上述方法人多具有實(shí)驗(yàn)周期長(zhǎng)、技術(shù)步驟煩瑣且工作量大等特點(diǎn)。cDNA末端快速擴(kuò)增技術(shù)(rapidamplificationofcDNAends,RACE)是一種基于PCR從低豐度的轉(zhuǎn)錄本中快速擴(kuò)增cDNA的5'和3'末端的有效方法,以其簡(jiǎn)單、快速、廉價(jià)等優(yōu)勢(shì)而受到越來(lái)越多的重視.經(jīng)典的RACE技術(shù)是由Frohman等(...

  • 20179-28
    實(shí)驗(yàn)助手——質(zhì)粒圖譜如何“瞅”

    每當(dāng)拿到一個(gè)質(zhì)粒圖譜,是不是一下就有點(diǎn)懵了?這些ori、RBS、tet是什么?這些箭頭代表什么,轉(zhuǎn)錄的方向嗎?不要著急,申知心生物把這些告訴你,也許會(huì)解決你的困惑。質(zhì)粒和載體傻傻分不清楚質(zhì)粒(Plasmid)是附加到細(xì)胞中的非細(xì)胞的染色體或核區(qū)DNA原有的能夠自主復(fù)制的較小的DNA分子(即細(xì)胞附殖粒、又胞附殖粒)。大部分的質(zhì)粒雖然都是環(huán)狀構(gòu)型。載體即要把一個(gè)有用的基因(目的基因——研究或應(yīng)用基因)通過(guò)基因工程手段送到生物細(xì)胞(受體細(xì)胞),需要運(yùn)載工具(交通工具)攜帶外源基因進(jìn)...

  • 20179-26
    實(shí)驗(yàn)助手—六大要素讓你告別RNA反轉(zhuǎn)錄失敗

    RTPrimer的佳選擇通常RTprimer可分為三類(lèi):oligodT,隨機(jī)引物以及基因特異性引物。OligodT引物之所以應(yīng)用范圍更加廣泛,是因?yàn)榭捎纱双@得mRNA的全長(zhǎng)拷貝。然而如果mRNA長(zhǎng)度過(guò)長(zhǎng)4kb,或者沒(méi)有polyA尾(原核mRNA或rRNA),就需要考慮使用隨機(jī)引物進(jìn)行RNA的反轉(zhuǎn)錄。隨機(jī)引物雖能長(zhǎng)基因的5’末端的轉(zhuǎn)錄,但并不能獲得整個(gè)基因全長(zhǎng)的cDNAs,且對(duì)RNA樣品質(zhì)量要求比較高,此時(shí)可用6-8個(gè)核酸聚合體來(lái)提高cDNAs的合成量。而對(duì)于真核生物的qPCR...

  • 20179-21
    解析幾個(gè)常見(jiàn)Elisa試劑盒使用過(guò)程中的困惑

    對(duì)于Elisa試劑盒的使用,總有解不完的疑問(wèn),比如說(shuō)加樣器不確;特別10ul以下的加樣器,對(duì)成果影響;保溫設(shè)備不良;洗刷用水不規(guī)范。如何解決這些疑問(wèn)呢:1、加樣不;沒(méi)有混勻。加樣時(shí)必定要細(xì)心。加樣后,再查看,以防漏加、錯(cuò)加。2、加樣后,重復(fù)抽吸3次混勻,防止血清集合孔底,致使非特異性吸附。洗刷洗刷不①每次灌水洗刷,應(yīng)停止30秒鐘;②選用吸水紙作為襯墊,每次洗刷后扣干孔內(nèi)水分;3、可選用塑料洗刷瓶。加酶反響漏加滴加后,細(xì)心查看各孔成果判別①包含陰性對(duì)照孔在內(nèi),各孔顯色普遍偏深;...

  • 20179-21
    科研有六重境界,你到第幾重了?

    臨淵羨魚(yú)階組里的前輩們看起來(lái)個(gè)個(gè)都是牛人,各有各的事業(yè),可是喂~誰(shuí)來(lái)提挈小生則個(gè)!導(dǎo)師:“在咱們這個(gè)組的大框架下自己找個(gè)坑填上去~”——坑在哪?師姐:“問(wèn)我問(wèn)題之前不能先自己查一下嘛?你這個(gè)問(wèn)題明明有現(xiàn)成答案呀~”——上哪查師兄:“去去去,小孩子一邊看文獻(xiàn)去!”——看不懂~_看什么文獻(xiàn),怎么看?專(zhuān)業(yè)術(shù)語(yǔ)不懂怎么辦?好吧,大不了啃字典,先把組里發(fā)過(guò)的文章都過(guò)一遍好了。終于有一天組會(huì)討論時(shí),哇我居然聽(tīng)懂了躍躍欲試階已經(jīng)能相當(dāng)熟練地在知網(wǎng)、NCBI等數(shù)據(jù)庫(kù)上查到自己想要的信息了,儀...

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