技術(shù)文章
Technical articles?2017年3月1日至3月20日項目申請集中接收期間,自然科學(xué)基金委員會(以下簡稱自然科學(xué)基金委)共接收項目申請190840項,經(jīng)初步審查和復(fù)審后共受理187135項。依據(jù)《自然科學(xué)基金條例》和自然科學(xué)基金相關(guān)管理辦法,經(jīng)專家評審和委務(wù)會議審批,決定資助面上項目18136項、重點項目667項、重大項目2項、重點(地區(qū))合作研究項目107項、青年科學(xué)基金項目17523項、青年科學(xué)基金項目399項、創(chuàng)新研究群體項目38項、海外及港澳學(xué)者合作研究基金項目142項、地區(qū)科學(xué)基金項目3...
蛋白質(zhì)組一詞源于蛋白質(zhì)與基因組兩個詞的組合,意指“一種基因組所表達(dá)的全套蛋白質(zhì)”,即包括一種細(xì)胞乃至一種生物所表達(dá)的全部蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)組學(xué)本質(zhì)上指的是在大規(guī)模水平上研究蛋白質(zhì)的特征,包括蛋白質(zhì)的表達(dá)水平,翻譯后的修飾,蛋白與蛋白相互作用等,由此獲得蛋白質(zhì)水平上的關(guān)于疾病發(fā)生,細(xì)胞代謝等過程的整體而的認(rèn)識。近兩年來蛋白質(zhì)組研究技術(shù)已被應(yīng)用到各種生命科學(xué)領(lǐng)域,如細(xì)胞生物學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)等。在研究對象上,覆蓋了原核微生物、真核微生物、植物和動物等范圍,涉及到各種重要的生物學(xué)現(xiàn)象,如信...
一、服務(wù)介紹免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)是指利用抗體與抗原間的特異性結(jié)合特性,將抗原(我們感興趣的靶蛋白)-抗體復(fù)合物從樣品中分離出來,達(dá)到初步分離純化靶蛋白的目的。之后,樣品可以再進(jìn)行Westernblot分析。二、實驗原理免疫沉淀是利用抗原與抗體免疫反應(yīng)達(dá)到純化,定性檢測蛋白的目的,即在蛋白質(zhì)提取液中加入與抗原(靶蛋白質(zhì))特異性結(jié)合的抗體,抗體與抗原結(jié)合后形成免疫復(fù)合物,再與蛋ProteinA/G或二抗偶聯(lián)的瓊脂糖珠子孵育,通過離心得到免疫復(fù)合...
一、服務(wù)介紹PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學(xué)上,主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色。隨著醫(yī)學(xué)實驗技術(shù)的發(fā)展,糖原染色應(yīng)用的范圍更加廣泛,如用以證明與鑒別細(xì)胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì),心肌病變及其他心血管疾病的診斷,糖原累積病診斷和研究,糖尿病的診斷和研究,用于某些腫瘤的診斷等。二、實驗原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色。PAS染色一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。過...
1.選擇好的RNA分離方法現(xiàn)有眾多的RNA分離方法也許令人難以取舍。目前簡單也是安全的方法是柱式分離,如RNApure因為操作簡單,時間短,純度高而受到大家的喜愛,RNApure不需要DNA酶消化DNA,節(jié)省了時間,避免RNA的降解,從而提高了產(chǎn)量;相對非柱式分離(如TRIZOL),去除蛋白及其他雜質(zhì)干凈,提高了純度,對于細(xì)胞、組織、一般植物均非常適合。植物RNA的提取比較難抉擇,植物RNA提取受酚、多糖、蛋白雜質(zhì)、次生代謝物含量的影響,一般用TRIZOL提取純度不高,而且很...
1.迅速滅活內(nèi)源的RNA酶,以防止RNA降解。以下3個方法均可有效使內(nèi)源RNA酶失活:1)用含離液(如胍鹽)的細(xì)胞裂解液收獲樣品,并立即勻漿。2)用液氮瞬間凍結(jié)樣品。值得特別注意的是:組織塊足夠小,在浸入液氮的瞬間就能凍結(jié),以瞬間令RNA酶失活。3)立即將樣品置于RNAfixer無液氮RNA樣品儲存液中。它是一種水相、無毒的收集試劑,能立即穩(wěn)定并保護(hù)完整、未凍結(jié)的組織和細(xì)胞樣品中的RNA。關(guān)鍵要點是組織樣品切片要夠薄(),這樣RNAfixer才能在RNase破壞RNA之前迅速...
Elisa試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)、已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。Elisa試劑盒試驗過程中需要特別注意的細(xì)節(jié)1、試劑準(zhǔn)備:試劑都在使用前達(dá)到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存。實驗操作中使用一次性吸頭,避免交叉污染;2.加樣:加樣時,...
血清的保存應(yīng)該注意以下幾點:(1)生物學(xué)實驗中需要長期保存的血清儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,預(yù)留體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。(2)熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已解凍的血清。生物學(xué)實驗中加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活。除非,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質(zhì)量。補(bǔ)體...